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1、開(kāi)機(jī)
插上電源,打開(kāi)儀器背面綠色電源開(kāi)關(guān),儀器顯示開(kāi)機(jī)畫面,按畫面提示操作,按下回車鍵,儀器開(kāi)始自檢,時(shí)間約1min。自檢完畢后,儀器進(jìn)入待機(jī)檢測(cè)狀態(tài)。
2、試劑配制(配套試劑:LS農(nóng)殘速測(cè)試劑)
2.1、緩沖液:取1包緩沖劑加入500mL蒸餾水或純凈水中,攪拌溶解制成磷酸緩沖液(pH7.6), 常溫保存。
2.2、顯色劑:取1瓶顯色劑加25mL緩沖液溶解,使用時(shí)取100μL,4℃冰箱保存。
2.3、底 物:取1瓶底物加12.5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時(shí)取100μL,4℃冰箱保存;
或取1瓶底物加2.5mL蒸餾水或純凈水溶解 ,使用時(shí)取20μL,4℃冰箱保存。
2.4、 膽堿酯酶:酶制劑無(wú)需配制,可直接取用,使用時(shí)取100μL,4℃冰箱保存。
3、樣品提取
取2g果蔬樣品(塊莖類取4g),葉菜剪成25px左右見(jiàn)方的碎片,塊莖類取橫截面樣品或取其表皮,放入三角瓶中,加入10mL緩沖液,振蕩1~2min ,倒出提取液,靜置2min,待測(cè)。若提取液混濁或雜質(zhì)太多可過(guò)濾后再測(cè)。
4、測(cè)試
4.1、 對(duì)照測(cè)試:于反應(yīng)瓶中加入2.5mL緩沖液,再分別加入100μL酶液和顯色劑,混勻,靜置反應(yīng)10min后加入100μL(或20μL)底物,搖勻并立即倒入比色杯中,及時(shí)放入儀器的測(cè)量室第1通道,合上蓋。按鍵,顯示屏下方延遲10s后,測(cè)量時(shí)間開(kāi)始,計(jì)時(shí)完畢,顯示屏顯示吸光度增量(ΔΑ0)及抑制率。在進(jìn)行對(duì)照測(cè)試時(shí),2~8通道可同時(shí)進(jìn)行樣品測(cè)試。
4.2、樣品測(cè)試:于反應(yīng)瓶中加入2.5mL待測(cè)液,再分別加入100μL酶液和顯色劑,混勻,靜置反應(yīng)10min后加入100μL(或20μL)底物,搖勻并立即倒入比色杯中,及時(shí)放入儀器的測(cè)量室通道,合上蓋。按 鍵打印。